心肌肌钙蛋白I（cTnI）的测定方法

心肌肌钙蛋白I（cTnI）是心肌损伤的敏感性和特异性指标，与其他检测指标相比，cTnI在血液中出现时间早、持续时间长。cTnI作为一项理想的心肌损伤标志物，对急性心肌梗死（AMI）、不稳定型心绞痛（UAP）等疾病的预测诊断、病情检测、疗效观察及预后评估都具有较高的临床价值。测定血清cTnI水平的方法有多种，本文主要介绍当下几个比较重要的测定技术，并简要分析了其特点。

酶联免疫吸附试验测定cTnI

酶联免疫吸附试验（ELISA）是一项被广泛用于临床的酶标固相免疫测定技术。ELISA检测cTnI主要方法是通过将待测血清与辣根过氧化物酶（HRP）标记的特异性抗体混合并孵育，再向包被了cTnI的微孔板中加入已经孵育好的混合液，由于微孔板之前包被的cTnI与待测样品中的cTnI共同竞争单抗，使得微孔板上的HRP被间接固定住，从而可通过测定被间接固定在微孔板中的HRP催化活性，与标准曲线对照计算得到待测血清中cTnI的浓度。目前，ELISA方法检测cTnI已经成熟化，适合于批量检测。但由于血清中cTnI的含量偏低，临床检测需快速，而ELISA步骤较为繁琐，测定所需时间偏长，且灵敏度相对偏低，因而此法在cTnI检测中的应用受到一定限制。

胶体金法测定cTnI

胶体金免疫层析技术主要通过双抗体夹心法原理定性检测人血清/血浆中的cTnI。在试剂卡中的纤维膜上质控线（C线）包被有羊抗鼠IgG，检测线（T线）包被有抗cTnI单克隆抗体-2，另一端包被有抗cTnI单克隆抗体-1-胶体金复合物。检测时，待测血清/血浆样品首先与抗cTnI单克隆抗-1-胶体金混合，并沿纤维膜向上层析依次通过T线、C线（C线必须显色，否则结果无效）。如果血清/血浆中有cTnI存在，cTnI首先和抗cTnI单克隆抗体-1-胶体金结合，形成“cTnI-抗cTnI单克隆抗体-1-胶体金复合物”，在层析至T线时，会被预先包被在T线的另一抗cTnI单克隆抗体-2捕获。结果显示在T线和C线处均出现一条红色线条，为阳性，表示样品中有超出检出灵敏度的cTnI存在，提示病人发生了心肌梗塞；若在T线处未形成线条，为阴性，表示样品中无cTnI存在或cTnI浓度低于检出灵敏度。胶体金法样本用量少，简便快捷，可快速获得诊断结果，其局限性在于结果只能初步定性分析，不能进一步定量分析。

化学发光法测定cTnI

化学发光法测定cTnI主要分为两类。一类是较为普遍应用的测定系统采用直接化学发光法，通过小分子化学发光剂吖啶酯直接标记抗原或抗体，反应洗涤后，在碱性条件下检测其发光强度，从而检测cTnI。另一类测定cTnI的化学发光系统多采用酶促化学发光双抗体一步夹心酶免疫分析法，以ALP作为标记物，用单克隆抗cTnI IgG抗体包被的磁性微粒为固相载体，检测时样品中的cTnI与包被在固相载体上的抗体及ALP标记的抗体形成夹心复合物，加入发光基质底物，测定其发光强度，通过多点标定曲线计算cTnI浓度。化学发光法不仅安全、灵敏，而且通用性强，但仪器成本相对ELISA法而言较高。

胶乳增强免疫比浊法测定cTnI

胶乳增强免疫比浊法测定cTnI是通过将cTnI与包被有特异性抗体的致敏胶乳颗粒结合，使相邻的胶乳颗粒彼此交联，测定一定波长下溶液浊度增加的程度与标本中cTnI含量关系。该测定方法不仅特异性强，灵敏度高，重复性好，线性范围宽，而且操作简便、快速，具有一定的临床应用价值。有研究者比较了3种cTnI试剂在自动生化分析仪分析后的性能参数，结果显示胶乳增强免疫比浊测定cTnI具有较高的精密度和灵敏度，与化学发光免疫分析具有良好的相关性。

cTnI作为心肌损伤的一项特异性指标，已被广泛应用于临床诊断、风险分层以及疗效观察等方面。有关cTnI的检测方法也在不断更新，除以上介绍的四种方法外，还有荧光分析法、质谱分析法、生物传感器法等等。在测定方法日趋完善的同时，广大研究者更需致力于cTnI测定标准化问题。

参考文献

[1]李玉芹，李会强. 肌钙蛋白I的检测方法和研究进展[J]. 哈尔滨医药, 2013, 29(3):231-232.
[2]陈浩全，曾嫚妮. 3种肌钙蛋白I试剂在自动生化仪上的分析性能验证[J]. 国际检验医学杂志, 2012, 33(20):2541-2543.

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